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化學發光免疫分析儀原理簡介
發布日期:2023/6/24 10:22:12

概念:化學發光標記免疫分析,別稱:化學發光免疫分析(CLIA ) ,是用化學發光劑直接標記抗原或抗體的免疫分析儀器。

化學發光免疫分析儀包含兩個部分, 即免疫反應系統和化學發光分析系統。

原理:利用化學發光物質經催化劑的催化和氧化劑的氧化, 形成一個激發態的中間體, 當這種激發態中間體回到穩定的基態時,同時發射出光子(hM) , 利用發光信號測量儀器測量光量子產額。免疫反應系統是將發光物質(在反應劑激發下生成激發態中間體)直接標記在抗原(化學發光免疫分析) 或抗體(免疫化學發光分析) 上, 或酶作用于發光底物。

化學發光免疫分析儀器中核心探測器件為光電倍增管(PMT),由單光子檢測并傳輸至放大器,并加高壓電流放大,放大器將模擬電流轉化為數字電流,數字電流將發光信號由R232數據線傳輸給電腦并加以計算,得出臨床結果。

化學發光標記免疫分析法

化學發光標記免疫分析又稱化學發光免疫分析(CLIA ) ,是用化學發光劑直接標記抗原或抗體的免疫分析方法。常用于標記的化學發光物質有吖啶酯類化合物——acridinium ester (AE) ,是有效的發光標記物 , 其通過起動發光試劑作用而發光, 強烈的直接發光在一秒鐘內完成,為快速的閃爍發光。吖啶酯作為標記物用于免疫分析, 其化學反應簡單、快速、無須催化劑; 檢測小分子抗原采用競爭法 ,大分子抗原則采用夾心法 , 非特異性結合少, 本底低; 與大分子的結合不會減小所產生的光量, 從而增加靈敏度。

發光酶免疫分析法

從標記免疫分析角度, 化學發光酶免疫分析( chemi luminescent enzyme immuno assay, CLEIA ) , 應屬酶免疫分析, 只是酶反應的底物是發光劑,操作步驟與酶免分析完全相同: 以酶標記生物活性物質(如酶標記的抗原或抗體) 進行免疫反應,免疫反應復合物上的酶再作用于發光底物,在信號試劑作用下發光, 用發光信號測定儀進行發光測定。目前常用的標記酶為辣根過氧化物酶(HRP) 和堿性磷酸酶(ALP) ,它們有各自的發光底物。

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